هزینه تبدیل بستن بستن چقدر است؟
هزینه تبدیل بستن بستن چقدر است؟

تصویری: هزینه تبدیل بستن بستن چقدر است؟

تصویری: هزینه تبدیل بستن بستن چقدر است؟
تصویری: تغییرات خودم تو بدنسازی/چی بودم چی شدم 2024, ممکن است
Anonim

دگرگونی . بین 1-5 میکرولیتر اضافه کنید بستن مخلوط به سلول های صالح برای دگرگونی . تمدید شده بستن با PEG باعث افت می شود دگرگونی کارایی (سریع بستن کیت). الکتروپوراسیون برای سازه های بزرگ (بیش از 10000 جفت باز) توصیه می شود.

در اینجا، چه مقدار محصول بستن برای تبدیل نیاز دارم؟

دگرگونی . بین 1-5 میکرولیتر اضافه کنید بستن مخلوط به سلول های صالح برای دگرگونی . تمدید شده بستن با PEG باعث افت می شود دگرگونی کارایی (سریع بستن کیت). الکتروپوراسیون برای سازه های بزرگ (بیش از 10000 جفت باز) توصیه می شود.

متعاقباً سؤال این است که رباط و دگرگونی چیست؟ در یک آزمایش شبیه سازی معمولی، محققان ابتدا یک قطعه DNA، مانند یک ژن، را در یک قطعه دایره ای از DNA به نام پلاسمید وارد می کنند. این مرحله از آنزیم های محدود کننده و DNA لیگاز استفاده می کند و a نامیده می شود بستن . بعد از یک بستن ، مرحله بعدی انتقال DNA به باکتری در فرآیندی به نام است دگرگونی.

متعاقباً ممکن است بپرسید که چه مقدار DNA برای بستن لازم است؟

غلظت کلی وکتور + درج باید بین 1-10μg/ml برای کارایی باشد بستن . بردار: نسبت های مولی درج بین 1:1 و 1:10 توصیه می شود (1:3 معمولی است). اگر از خود مطمئن نیستید DNA غلظت، بستن چندگانه با نسبت های مختلف انجام دهید.

چه مدت می توانید واکنش بستن را ذخیره کنید؟

رباط ها می توانند در دمای اتاق یا خنک تر (فکر کنید 12-16 درجه سانتیگراد) در طول شب یا حتی برای چند روز انجام شود. اگر شما واقعا سرم شلوغه تو می توانی همچنین بستن بستن در یخچال قرار دهید و بعداً آن را بیرون بیاورید تا به مدت زمان در دمای اتاق به بستن ادامه دهید طولانی تا جایی که لازم است.

توصیه شده: