چگونه غلظت DNA با استفاده از اسپکتروفتومتر محاسبه می شود؟

2024 نویسنده: Miles Stephen | [email protected]. آخرین اصلاح شده: 2023-12-15 23:35

غلظت DNA است برآورد شده توسط اندازه گیری جذب در 260 نانومتر، تنظیم A₂₆₀ اندازه گیری کدورت ( اندازه گیری شده توسط جذب در 320 نانومتر)، ضرب توسط فاکتور رقت و استفاده كردن رابطه ای که یک A₂₆₀ dsDNA خالص 1.0 = 50μg/ml.

مردم همچنین می پرسند، چگونه غلظت و خلوص DNA را پیدا می کنید؟

برای ارزیابی خلوص DNA ، جذب را از 230 نانومتر تا 320 نانومتر اندازه گیری کنید تا سایر آلاینده های احتمالی را شناسایی کنید. شایع ترین محاسبه خلوص نسبت جذب در 260 نانومتر تقسیم بر قرائت در 280 نانومتر است. کیفیت خوب DNA A خواهد داشت₂₆₀/آ₂₈₀ نسبت 1.7-2.0.

به همین ترتیب، غلظت DNA خوب چیست؟ آ خوب کیفیت DNA نمونه باید دارای A باشد₂₆₀/آ₂₈₀ نسبت 1.7-2.0 و A₂₆₀/آ₂₃₀ نسبت بیشتر از 1.5 است، اما از آنجایی که حساسیت تکنیک های مختلف به این آلاینده ها متفاوت است، این مقادیر فقط باید به عنوان راهنمای خلوص نمونه شما در نظر گرفته شوند.

با توجه به این موضوع، نانودراپ چگونه غلظت DNA را محاسبه می کند؟

شما مقدار جذب در 260 نانومتر را در یک ضریب ثابت ضرب کنید (50 برای DNA ) و شما دریافت می کنید غلظت DNA . وویلا. (خوب، از نظر فنی A260 یک نمونه 10 میلی متری ضخامت است که در 50 ضرب می شود. نانو قطره A260 را طوری بیان می کند که گویی نمونه 10 میلی متر ضخامت دارد، مانند یک کووت استاندارد).

چرا باید از اسپکتروفتومتر برای تعیین کمیت DNA خود استفاده کنیم؟

آ اسپکتروفتومتر است قادر به تعیین غلظت متوسط اسیدهای نوکلئیک است DNA یا RNA موجود در یک مخلوط و همچنین خلوص آنها. استفاده كردن قانون بیر-لامبرت آن را است می توان میزان نور جذب شده را با غلظت مولکول جذب کننده مرتبط کرد.